培養(yǎng)皿知識(shí)普及
培養(yǎng)皿 概 述
培養(yǎng)皿是一種用于盛載液體培養(yǎng)液或固體瓊脂培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的玻璃或塑料圓形器皿。培養(yǎng)皿由一個(gè)底和一個(gè)蓋組成。是用作培養(yǎng)**的化學(xué)器材。一般由玻璃或者塑料作成。培養(yǎng)皿質(zhì)地脆弱、易碎,故在清洗及拿放時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿**及時(shí)清洗干凈,存放在**、固定的位置,防止損壞、摔壞。
培養(yǎng)皿 歷史發(fā)展
分離培養(yǎng)微生物,離不開固體培養(yǎng)基。在微生物實(shí)驗(yàn)室里,固體培養(yǎng)基的使用是如此地頻繁和常規(guī),以至于這一方法看起來(lái)也理所當(dāng)然。然而,回溯至1881年固體培養(yǎng)基出現(xiàn)以前,微生物的培養(yǎng)還只能在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行。為了能直接觀察培養(yǎng)物的形態(tài)及生長(zhǎng)情況,科學(xué)家希望能將微生物培養(yǎng)在固體表面上,就像微生物生長(zhǎng)在橘子皮或土豆上一樣。德國(guó)醫(yī)生羅伯特·科赫(Robert·Koch,1843—1910)曾用煮沸**的土豆來(lái)培養(yǎng)**。此后,他試著用明膠作培養(yǎng)基的凝固劑。他將明膠加入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行融化,然后將混合均勻的液體緩慢地倒在一塊玻璃板的表面。當(dāng)明膠冷卻凝固后,就在玻璃板表面形成一層固體培養(yǎng)基。為了防止空氣中雜菌的污染,科赫還用玻璃罩將玻璃板與周圍環(huán)境隔離開來(lái)。但是,人們很快發(fā)現(xiàn),明膠在20 ℃以上就變軟了,很難進(jìn)行分離微生物的劃線操作。在溫度高于25 ℃時(shí),明膠就液化了,而大多數(shù)**的培養(yǎng)溫度都不低于25 ℃。科赫的同事Walter Hesse也為同樣的問題苦惱著。一次,Hesse的妻子Fannie建議丈夫試一試用瓊脂做凝固劑,因?yàn)镕annie用瓊脂做果凍做得不錯(cuò)。Hesse采納了妻子的建議,發(fā)現(xiàn)瓊脂比明膠更適合做培養(yǎng)基的凝固劑。這個(gè)改進(jìn)的方法很快就被大家采納。
1887年,Richard Petri發(fā)表了一篇短文,對(duì)Koch平板技術(shù)作了又一次的改進(jìn)。Petri設(shè)計(jì)了一種圓形并帶有圍邊的雙盤,一個(gè)大,一個(gè)小。制作固體培養(yǎng)基時(shí),將融化的培養(yǎng)基倒入小盤內(nèi),然后再用大盤蓋在小盤上就可以了。這就是我們今天所使用的培養(yǎng)皿。Richard Petri的這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)為**分類學(xué)、遺傳學(xué)和其他相關(guān)學(xué)科的發(fā)展提供了極為重要的工具。
培養(yǎng)皿 分 類
根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細(xì)胞培養(yǎng)皿和**培養(yǎng)皿;
根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿,但進(jìn)口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。
根據(jù)大小的不同通常可分為直徑為35mm,60mm,90mm。150mm培養(yǎng)皿;
根據(jù)分隔的不同又可分為2分隔培養(yǎng)皿,3分隔培養(yǎng)皿等
培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離**的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿 材 質(zhì)
培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿 產(chǎn)品特點(diǎn)
***級(jí),表面未處理;
*真空-氣體血漿處理的表面化學(xué)特性一致,促進(jìn)細(xì)胞貼壁;
*專門設(shè)計(jì)的培養(yǎng)皿蓋有利*適氣體交換;
*疊放環(huán)使疊放和處理更加容易;
*γ射線**,無(wú)熱源;
培養(yǎng)皿&蒸發(fā)皿 區(qū) 別
培養(yǎng)皿和蒸發(fā)皿的區(qū)別:
培養(yǎng)皿由一個(gè)底和一個(gè)蓋組成,一般用來(lái)做培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。一般由玻璃或者塑料作成。上蓋有保溫保濕作用。而蒸發(fā)皿是沒有蓋的,是用于蒸發(fā)濃縮溶液或灼燒固體的器皿。口大底淺,有圓底和平底帶柄的兩種。*常用的為瓷制蒸發(fā)皿,也有玻璃、石英、鉑等制成的。質(zhì)料不同,耐腐蝕性能不同,應(yīng)根據(jù)溶液和固體的性質(zhì)適當(dāng)選用。
培養(yǎng)皿 用 途
適用于防疫站、醫(yī)院、生物制品、食品工業(yè)、制藥工業(yè)等單位,用于**的分離培養(yǎng)、**素效價(jià)檢驗(yàn)和定性檢驗(yàn)分析。在農(nóng)業(yè)、水產(chǎn)等科學(xué)研究用于對(duì)種子發(fā)牙、植物、昆蟲、魚種的人工培養(yǎng)、孵化研究。電子工業(yè)或其它行業(yè)作為器皿使用。
培養(yǎng)皿 使用指南
培養(yǎng)皿 使用方法:
培養(yǎng)皿通常使用固體培養(yǎng)基制成平板培養(yǎng)(就是平板皿名稱的由來(lái)),平板培養(yǎng)基制作是將已裝好的**瓊脂培養(yǎng)基,用溫水(無(wú)菌)溶化,取下試管棉花塞,管口于酒精燈火焰上通過(guò),然后微啟**的培養(yǎng)皿蓋,使試管口能深入為宜,傾入培養(yǎng)基后即可蓋密,再輕輕地?fù)u勻傾入的培養(yǎng)基,使之均勻地分布于皿底上凝結(jié),即得平板培養(yǎng)基。由于**的繁殖、發(fā)育生長(zhǎng)是與所供給的培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng))有直接關(guān)系,尤其是作定量檢驗(yàn)分析,對(duì)提供營(yíng)養(yǎng)物的多少,有決定意義。**培養(yǎng)時(shí)對(duì)營(yíng)養(yǎng)提供的多秒、是否均勻,培養(yǎng)皿皿底是否平整極為重要,如培養(yǎng)皿皿底不平,瓊脂的培養(yǎng)基分布將隨培養(yǎng)皿皿底是否平整有厚有薄,薄的部分營(yíng)養(yǎng)供給就不足,這對(duì)定量分析有著密切關(guān)系,故對(duì)定量培養(yǎng)皿皿底要求特別平整拜原因所在。但作一般定性(檢驗(yàn)**、菌落生長(zhǎng)、繁殖等),使用普通培養(yǎng)皿即可。
**的分離培養(yǎng),一般標(biāo)本中常同時(shí)混有數(shù)種**,如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等,凡需研究的**,須先用分離培養(yǎng)法,使其成純種培養(yǎng),通過(guò)對(duì)**作純種培養(yǎng),用肉汁加2%瓊脂的固體培養(yǎng)基,經(jīng)保溫漏斗以脫脂棉花過(guò)濾,注入試管中,二天后檢驗(yàn)無(wú)新菌,再投入培養(yǎng)皿內(nèi),先制成平板,在無(wú)菌條件下進(jìn)行接種,接種后把培養(yǎng)皿倒置移入25~35℃的恒溫箱內(nèi)(倒置是避免水蒸氣凝成液滴滴入皿底內(nèi),影響菌落的生長(zhǎng)),通過(guò)培養(yǎng)進(jìn)一步觀察**的形態(tài)和色澤,研究致病的病菌,以及對(duì)化防治的效果。
培養(yǎng)皿使用注意事宜:
1.使用前經(jīng)過(guò)清潔**,培養(yǎng)皿清潔與否對(duì)工作影響較大,可影響培養(yǎng)基的酸堿度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會(huì)抑制**生長(zhǎng)。
2.新購(gòu)的培養(yǎng)皿應(yīng)先用熱水沖洗,再置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí),使游離堿性物質(zhì)除去,再用蒸餾水沖洗2次。
3.若要培養(yǎng)**,再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣),120℃的溫度下30min**,置室溫中干燥,或用干熱**,就是將培養(yǎng)皿置于烘箱內(nèi),溫度控制在120℃左右的情況下維持2h,即可殺死**的胞牙。
4.經(jīng)過(guò)**的培養(yǎng)皿才能接種培養(yǎng)使用。
5. 平版培養(yǎng)時(shí)為何把培養(yǎng)皿倒置:
培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)皿中會(huì)產(chǎn)生較多的水蒸氣,水蒸氣在皿蓋上凝結(jié)會(huì)產(chǎn)生水滴,如果培養(yǎng)皿正置,水滴滴下會(huì)將菌落沖散,這樣的話一個(gè)大菌落可能會(huì)分散開成為很多小菌落,對(duì)**的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)都造成很大的麻煩。如果導(dǎo)致的話,培養(yǎng)基在上,皿蓋在下,水滴滴下不會(huì)滴到菌落上。
培養(yǎng)皿 清 潔
(一) 浸泡
新的或用過(guò)的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來(lái)水簡(jiǎn)單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過(guò)夜;用過(guò)的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應(yīng)立即浸入清水中備刷洗。
(二) 刷洗
將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復(fù)刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。
(三) 浸酸
浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過(guò)酸液的強(qiáng)氧化作用**器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應(yīng)少于六小時(shí),一般過(guò)夜或更長(zhǎng)。放取器皿要小心。
(四) 沖洗
刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復(fù)注水-倒空15次以上,**用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。